根據(jù)《獸藥管理條例》規(guī)定，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部組織制定了清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）檢查方法，現(xiàn)予發(fā)布，自發(fā)布之日起執(zhí)行。
農(nóng)業(yè)農(nóng)村部將加強相關(guān)獸藥產(chǎn)品監(jiān)督抽檢力度，對發(fā)現(xiàn)的非法添加行為，按照獸藥嚴(yán)重違法行為從重處罰情形嚴(yán)厲查處。
附件：清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）檢查方法
農(nóng)業(yè)農(nóng)村部
2024年6月17日
附件
清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）檢查方法
1 適用范圍
1.1 本方法適用于清瘟敗毒片中非法添加三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）的檢查。
1.2 用于其他獸藥制劑中非法添加三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）檢查時，需進行空白試驗和檢測限測定。
2 檢查方法
照高效液相色譜法（《中國獸藥典》二部附錄0512）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（Thermo Hypersil Gold C18（100mm×2.1mm，1.9 μm或效能相似的色譜柱）；以甲醇-50 mmol/L甲酸銨溶液（20:80）為流動相，流速為每分鐘0.3 ml；柱溫為30℃；二極管陣列檢測器，采集波長范圍為200~400 nm，分辨率為1.2 nm，記錄246 nm波長處的色譜圖。供試品溶液中三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）色譜峰與相鄰色譜峰的分離度應(yīng)符合要求。
測定法 取供試品10片，研細，稱取1.0 g，置50 ml離心管中，加提取液[0.1 mol/L鹽酸溶液-乙腈（1:1）]20 ml，渦旋混勻，振搖20 分鐘，離心（每分鐘9000轉(zhuǎn)）5 分鐘；取上清液1.0 ml，置100 ml量瓶中，用0.1%甲酸溶液稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液。另取三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）對照品適量，用0.1%甲酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含10 μg的溶液，作為對照品溶液。取供試品溶液和對照品溶液各5 ?l，分別注入液相色譜儀，同時記錄色譜圖和光譜圖。必要時，可調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛龋箖烧叻迕娣e接近。通過與對照品溶液色譜圖保留時間、光譜圖的對比，確定供試品中是否含有三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）。
3 結(jié)果判定
3.1供試品溶液色譜圖中如出現(xiàn)與三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）對照品色譜圖中保留時間一致的色譜峰（差異不大于±5%），且為單一物質(zhì)峰；在規(guī)定的采集波長范圍內(nèi)，兩者紫外光譜圖匹配，且最大吸收波長一致（差異不大于±2nm），判定為檢出三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）。
3.2 供試品溶液色譜圖中峰保留時間與三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）相同，但峰面積小于檢測限峰面積，判定為未檢出三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）。
4 檢測限
本方法檢測限為0.4 g/kg。
附
1.三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）
C12H13N5O4 291.26
?。?R,3R,4S,5R）-2-（4-氨基吡咯并[2,1-f][1，2，4]三嗪-7-基）-3,4-二羥基-5-（羥甲基）四氫呋喃-2-甲腈
2.三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）對照品色譜圖
3.三磷酸核苷競爭性抑制劑（GS-441524）對照品光譜圖
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