近日,中國(guó)熱科院分析測(cè)試中心傳感與光電檢測(cè)技術(shù)研究團(tuán)隊(duì)在農(nóng)產(chǎn)品真菌毒素的快速檢測(cè)方面取得重要進(jìn)展。團(tuán)隊(duì)利用便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)器作為信號(hào)檢測(cè)設(shè)備,開(kāi)發(fā)出一種用于快速、靈敏檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A(OTA)的粒子計(jì)數(shù)免疫傳感器,為真菌毒素的便攜檢測(cè)提供了一種新方案。
赭曲霉毒素A(OTA)是一種由曲霉菌和青霉菌產(chǎn)生的有害真菌毒素,廣泛存在于谷物、葡萄酒和咖啡等農(nóng)產(chǎn)品中。這種毒素的污染不僅威脅人類(lèi)健康,還影響農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的完整性。OTA可引發(fā)腎臟、肝臟和神經(jīng)系統(tǒng)損傷,甚至可能影響發(fā)育和免疫系統(tǒng)。因此,快速精準(zhǔn)地檢測(cè)OTA,對(duì)于保障農(nóng)產(chǎn)品安全和公眾健康具有重要意義。
近年來(lái),便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)器因其便捷性和高效性,在科研與商業(yè)領(lǐng)域備受關(guān)注。本研究以庫(kù)爾特原理為基礎(chǔ),提出使用聚苯乙烯(PS)微球作為信號(hào)探針,結(jié)合高效的銅催化疊氮-炔環(huán)加成(CuAAC)反應(yīng)作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)策略,構(gòu)建了新型的粒子計(jì)數(shù)免疫傳感器用于檢測(cè)OTA。團(tuán)隊(duì)采用一鍋法在室溫下合成了具有良好分散性和均勻性的SiO?@CuO?殼核納米顆粒,作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)介質(zhì)。隨后,選用粒徑較大且肉眼可見(jiàn)的1 mm聚苯乙烯微球(PS1mm)作為反應(yīng)和分離載體,并使用4 μm聚苯乙烯微球(PS4μm)作為信號(hào)探針。在PS1mm表面修飾疊氮基團(tuán)(azide),PS4μm表面修飾炔基(alkyne),通過(guò)CuAAC反應(yīng),使大量的alkyne-PS4μm結(jié)合到單個(gè)azide-PS1mm表面。反應(yīng)結(jié)束后,azide-PS1mm與其結(jié)合的alkyne-PS4μm因重力作用快速沉降,無(wú)需手動(dòng)分離;而未反應(yīng)的alkyne-PS4μm則懸浮在溶液中,可直接用于檢測(cè)。整個(gè)檢測(cè)流程從免疫反應(yīng)開(kāi)始,免疫反應(yīng)完成后,SiO?@CuO?納米顆粒促進(jìn)CuAAC反應(yīng),進(jìn)一步推動(dòng)alkyne-PS4μm與azide-PS1mm的結(jié)合。最后,使用便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)器測(cè)量溶液中未反應(yīng)的alkyne-PS4μm數(shù)量,并通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析其剩余數(shù)量來(lái)確定OTA濃度。該方法的檢測(cè)限低至34 pg/mL,為農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素的快速、安全檢測(cè)提供了新的技術(shù)思路。
該研究成果以“A particle counting immunosensor for the sensitive detection of ochratoxin A via click chemistry-mediated signal amplification”為題發(fā)表于《Journal of Hazardous Materials》。中國(guó)熱科院分析測(cè)試中心陳瑞助理研究員為第一作者,大連工業(yè)大學(xué)陳翊平教授等為共同通訊作者。該研究得到海南省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃專(zhuān)項(xiàng)等項(xiàng)目的支持。
文章鏈接:https://doi.org/10.1016/j.jhazmat.2025.137381