羊乳營養(yǎng)價值高,具有易消化吸收、低致敏性等優(yōu)點,是嬰幼兒配方奶粉乳基配料的重要來源之一。羊乳含有一系列結構多樣的活性寡糖成分,具有促進嬰幼兒健康成長發(fā)育、調節(jié)腸道菌群等作用。成熟羊乳寡糖(GMOs)的含量可達0.25-0.3 g/L,是牛乳寡糖含量的4-10倍,活性寡糖的含量遠高于其它動物乳,與母乳寡糖組成接近,有望成為研發(fā)母乳化嬰幼兒配方食品的新型功能性配料。
王仲孚教授團隊多年來圍繞山羊乳寡糖研究開展了系列工作,前期基于生物質譜技術定性定量比較了不同泌乳期、不同胎次山羊乳糖蛋白N/O-寡糖組的差異,發(fā)現隨著泌乳期的延長,糖蛋白N/O-寡糖組的含量呈現先上升后下降的趨勢,與游離寡糖的變化趨勢呈互補現象;隨著胎次的延長,糖蛋白N/O-寡糖組的含量呈上升的趨勢(Food Chem. 2021, 16;342:128221;J. Agric. Food Chem. 2020, 68(7): 2174-2182.)。
基于前期研究基礎,本研究深入開展了山羊乳特征性游離寡糖半乳糖基乳糖的質譜分析研究,建立了一種高靈敏度分離和鑒定羊乳特征性寡糖半乳糖基乳糖異構體的方法,并利用高效液相色譜(HPLC)結合全甲基化分析、多級串聯(lián)質譜(ESI-MSn)以及在線液質聯(lián)用等技術定性定量比較了不同泌乳期山羊乳半乳糖基乳糖同分異構體的差異。結果發(fā)現,半乳糖基乳糖是羊乳中含量最豐富且具有多種異構體的寡糖結構,分別為:β6'-GL、α6'-GL、β4'-GL、α3'-GL和β3'-GL,其中α6'-GL和β4'-GL是首次發(fā)現的山羊乳特征性半乳糖基乳糖結構。經相對定量分析,發(fā)現五種半乳糖基乳糖異構體的總含量在過渡乳中最高,β3'-GL是初乳中的主要異構體,α3'-GL是過渡乳和成熟乳中的主要異構體。過渡乳中β3'-GL是初乳的5倍,是成熟乳的2倍,過渡乳中α3'-GL的含量是初乳的2倍,是成熟乳的10倍;經絕對定量分析,發(fā)現初乳中β3'-GL含量最豐富為32.31 mg/L,過渡乳和成熟乳中α3'-GL含量最豐富,分別為88.12 mg/L和36.25 mg/L。該結果為深入研究山羊乳半乳糖基乳糖的結構與功能關系奠定基礎,對發(fā)展以特征性寡糖分子為標志物的羊乳及其制品質量控制體系具有重要意義,為開發(fā)以半乳糖基乳糖為配料的功能性食品提供科學依據。
該研究以“Qualitative and quantitative mass spectrometry comparison of characteristic galactosyl lactose isomers from goat milk at different lactation stages”為題發(fā)表于乳品科學領域國際著名學術期刊《Journal of Dairy Science》(Q1,Top期刊,全球乳品科學領域期刊排名第一,IF=4.225),王心怡碩士為第一作者,路宇副教授和王仲孚教授為共同通訊作者。該研究獲得國家自然科學基金(No. 31972024和31870798)和陜西省創(chuàng)新能力支撐計劃和科技創(chuàng)新團隊(2020TD-044)資助。
論文鏈接:https://doi.org/10.3168/jds.2021-21701