近日,青海省科技廳組織專家對(duì)青海大學(xué)承擔(dān)的國(guó)際科技合作專項(xiàng)“牦牛多殺性巴氏桿菌烈性噬菌體與宿主菌的互作機(jī)制研究”進(jìn)行了驗(yàn)收及成果評(píng)價(jià)。
項(xiàng)目從青海省牦牛糞便污水中分離到一株多殺性巴氏桿菌噬菌體vB_PmuP_Pa7(Pa7),是具有特異性高、潛伏期短、裂解效率高、耐受一定高溫和酸堿環(huán)境的烈性噬菌體,為抗菌藥物減量化研究提供了候選毒株;通過(guò)與青島農(nóng)業(yè)大學(xué)、日本宮崎大學(xué)合作,進(jìn)行技術(shù)融合與創(chuàng)新,運(yùn)用生物信息學(xué)分析Pa7是一株新型的T7-like噬菌體,基因組不含毒力因子和耐藥性因子,未檢測(cè)到tRNA基因,預(yù)測(cè)出了與噬菌體侵染相關(guān)的ORF11、ORF13、ORF23、ORF31編碼的關(guān)鍵功能蛋白,表明Pa7具有開(kāi)發(fā)為抗多殺性巴氏桿菌制劑的潛力;利用RNA-Seq技術(shù)對(duì)Pa7與宿主菌進(jìn)行了研究,明晰了噬菌體主要功能基因的表達(dá)順序和宿主對(duì)噬菌體侵染的轉(zhuǎn)錄應(yīng)答模式;篩選到編碼半乳糖-1-磷酸尿苷基轉(zhuǎn)移酶、TRAP轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白滲透酶、30S核糖體蛋白S17以及ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體底物結(jié)合蛋白的4個(gè)高差異表達(dá)的關(guān)鍵互作基因,并通過(guò)RT-qPCR進(jìn)行了驗(yàn)證。
項(xiàng)目實(shí)施期間,與青島農(nóng)業(yè)大學(xué)、日本宮崎大學(xué)聯(lián)合培養(yǎng)碩士研究生1名、學(xué)術(shù)骨干2名,并在期刊《Veterinary Sciences》共同發(fā)表了學(xué)術(shù)論文1篇。
項(xiàng)目研究成果為研發(fā)安全、綠色的抗牦牛多殺性巴氏桿菌病的新型環(huán)保制劑提供了技術(shù)支撐,對(duì)青海省防治牦牛出血性敗血癥意義重大。