中國熱科院環(huán)植所荔枝龍眼團隊在荔枝生物育種技術研究方面取得新進展,建立了我國荔枝主栽品種‘妃子笑’的遺傳轉化及CRISPR/Cas9基因編輯技術體系,并獲得了荔枝多酚氧化酶基因(LcPPO)突變的荔枝植株,為解析LcPPO調控荔枝組織褐變機制和創(chuàng)制抗褐變荔枝新品種提供了重要的材料基礎,具有重要潛在應用價值。
荔枝是原產(chǎn)我國的熱帶亞熱帶常綠果樹,荔枝產(chǎn)業(yè)是鄉(xiāng)村振興的支柱產(chǎn)業(yè)之一,但生產(chǎn)中存在采后果皮易褐變等瓶頸問題。培育耐褐變荔枝新品種是解決問題的根本途徑。轉基因和CRISPR/Cas9基因編輯技術等現(xiàn)代育種技術是定點改造目標性狀基因,加快育種進程的重要手段。研究團隊以‘妃子笑’荔枝胚性愈傷組織為受體,探明了20mg·L?1的潮霉素和600mg·L?1的羧芐青霉素為適宜的轉基因材料篩選劑和農桿菌生長抑制劑,并以GUS基因和GFP基因為報告基因,確定了影響農桿菌介導遺傳轉化效率主要因素的最優(yōu)參數(shù)。
研究團隊以LcPPO為靶基因,構建了CRISPR/Cas9基因編輯載體,通過農桿菌介導轉化‘妃子笑’荔枝胚性愈傷組織,經(jīng)過潮霉素篩選獲得了陽性胚性愈傷組織。然后,經(jīng)體胚發(fā)生途徑的離體再生技術體系,最終獲得了LcPPO發(fā)生堿基突變的基因編輯荔枝植株,并移栽成活。
研究成果以“Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of embryogenic callus and CRISPR/Cas9-mediated genome editing in 'Feizixiao'litchi” 為題發(fā)表于《Horticultural Plant Journal》。中國熱科院環(huán)植所王樹軍助理研究員為論文第一作者,王家保研究員為論文通訊作者。該研究獲得國家重點研發(fā)計劃、海南省重點研發(fā)計劃、國家荔枝龍眼產(chǎn)業(yè)技術體系育種技術與方法崗位等項目的資助。
論文鏈接:https://authors.elsevier.com/sd/article/S2468-0141(23)00123-1
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