近日,中國水產(chǎn)科學(xué)研究院北戴河中心實(shí)驗(yàn)站牙鲆遺傳育種創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)在鲆鰈魚類套式病毒(Chinook salmon bafinivirus,CSBV)快速檢測研究上取得新進(jìn)展,首次利用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)建立了一種現(xiàn)場快速檢測CSBV的方法。相關(guān)研究成果以“Rapid and specific detection of Chinook salmon bafinivirus (CSBV) in flatfish using loop-mediated isothermal amplification (LAMP)”為題發(fā)表于《Aquaculture International》(JCR 1區(qū)期刊,IF: 2.9,全文網(wǎng)址為:https://doi.org/10.1007/s10499-023-01285-3)。
CSBV是引起鲆鰈魚類“出血癥”主要病原體之一,其引起鲆鰈魚類底板出血、爛鰭爛尾、肝臟出血等癥狀,并導(dǎo)致大量死亡。該病毒屬于套式病毒目(Nidovirales),托巴套氏病毒科(Tobaniviridae),Oncotshavirus屬,對(duì)于易感的鲆鰈魚類,致死率可高達(dá)70%以上。北戴河站分別于2019年和2022年在河北省以及遼寧省分離得到CSBV的兩株新毒株,分別命名為:CSBV Bces-Po19(牙鲆分離株),CSBV Bces-Sm22(大菱鲆分離株)。截至目前,該病毒擴(kuò)散到遼寧省、河北省的多個(gè)鲆鰈魚類養(yǎng)殖場,對(duì)鲆鰈魚類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重影響,成為了制約產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重大瓶頸。
為了彌補(bǔ)現(xiàn)有CSBV檢測方法操作復(fù)雜、對(duì)于設(shè)備要求高的問題,研究團(tuán)隊(duì)基于LAMP技術(shù)建立的快速檢測方法,可以通過一小時(shí)內(nèi)的恒溫?cái)U(kuò)增就能通過肉眼觀察顏色變化來得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果,完成檢測;并且還可通過瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行再次驗(yàn)證。結(jié)果表明,在65℃恒溫?cái)U(kuò)增1h后,檢出限低至10 pg/μL。該方法在具備操作簡單、對(duì)于設(shè)備要求低等優(yōu)點(diǎn)的同時(shí),更加具備擴(kuò)增特異性高,靈敏度高的優(yōu)勢。
上述研究得到中國水產(chǎn)科學(xué)研究院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(2023TD41),河北省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(21326307D)以及國家海水魚產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-47)等項(xiàng)目的資助。
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