近日，《酶學(xué)方法》（Methods in Enzymology）叢書在線發(fā)表了安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院劉琳實(shí)驗(yàn)室撰寫的論文，題為“Production and structural characterization of the cytochrome P450 enzymes in carotene ring hydroxylation”。該文是第671卷中的一章，描述了對(duì)細(xì)胞色素P450第97家族（CYP97）進(jìn)行重組制備、活性檢測(cè)與結(jié)構(gòu)解析的實(shí)驗(yàn)操作方法。

 

　　《酶學(xué)方法》叢書是生物化學(xué)領(lǐng)域最常用的參考書之一，創(chuàng)立于1955年，已發(fā)表664卷。將于今年7月正式出版的《酶學(xué)方法》第671卷匯集了近年來在類胡蘿卜素研究領(lǐng)域的進(jìn)展。在我院撰寫的這一章里，作者以CYP97B3為例，詳細(xì)總結(jié)了對(duì)CYP97及其還原系統(tǒng)進(jìn)行表達(dá)、純化、表征的經(jīng)驗(yàn)，回顧了對(duì)CYP97A3和CYP97C1進(jìn)行結(jié)晶及結(jié)構(gòu)解析的步驟。CYP97的主要功能是催化α-胡蘿卜素紫羅蘭酮環(huán)上的羥化反應(yīng)。植物CYP97包括A、B、C三個(gè)亞家族，模式植物擬南芥基因組編碼了CYP97A3、CYP97B3、CYP97C1。我院和首都師范大學(xué)、中科院植物研究所合作完成了CYP97A3和CYP97C1的結(jié)構(gòu)解析（圖1），研究結(jié)果已在2020年發(fā)表于PNAS雜志。

 

　　生命科學(xué)學(xué)院青年教師汪佳為該章的第一作者，劉琳教授為通訊作者。研究得到了科技部和國(guó)家自然科學(xué)基金的資助。

 

　　圖1、CYP97A3和CYP97C1的結(jié)構(gòu)及其催化的反應(yīng)。CYP97A3和CYP97C1的結(jié)構(gòu)用飄帶模型表示，螺旋為藍(lán)色、折疊股為黃色、卷曲為青色；血紅素、視黃醛、去垢劑分別為品紅、橙、黑色；淡綠色背景表示膜界面。

 

　　論文鏈接：

 

　　1. Wang J, Niu G, Guo Q, Liu L.* Production and structural characterization of the cytochrome P450 enzymes in carotene ring hydroxylation. Methods in Enzymology. 2022. Online

 

　　2. Niu G, Guo Q, Wang J, Zhao S, He Y.*, Liu L.* Structural basis for plant lutein biosynthesis from α-carotene. PNAS. 2020. 117 （25） 14150-14157.