D-阿洛酮糖是一種接近零熱量的稀少糖,對(duì)血糖和胰島素水平幾乎無(wú)影響,但具有蔗糖的口感,被美國(guó)食品和藥物管理局(FDA)認(rèn)定為安全的食品添加劑。最近,美國(guó)甜味劑供應(yīng)商推出的CannaSweet新產(chǎn)品,由阿洛酮糖、甜菊糖苷以及羅漢果苷復(fù)配而成,新品僅有0.2千卡/克的熱量,符合清潔標(biāo)簽及減糖理念。然而,D-阿洛酮糖轉(zhuǎn)化合成關(guān)鍵酶,主要采用大腸桿菌(E. coli)作為表達(dá)宿主,存在食品安全風(fēng)險(xiǎn),迫切需要開(kāi)發(fā)高效的食品級(jí)安全表達(dá)系統(tǒng)制備糖酶。
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中國(guó)科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所研究員孫媛霞帶領(lǐng)的功能糖與天然活性物質(zhì)研究團(tuán)隊(duì),以食品級(jí)谷氨酸棒桿菌為出發(fā)菌株,采用同工酶串聯(lián)組合表達(dá)策略構(gòu)建生產(chǎn)菌株,所獲得的糖酶酶活力提高了約20倍。同時(shí)設(shè)計(jì)和構(gòu)建了基于雙酶偶聯(lián)轉(zhuǎn)化蔗糖制備阿洛酮糖的綠色工藝,酶固定循環(huán)轉(zhuǎn)化重復(fù)使用30次,酶活仍保持80%以上,為D-阿洛酮糖食品安全的低成本制備奠定了基礎(chǔ)。
該研究得到國(guó)家自然科學(xué)基金、中科院青促會(huì)基金資助,研究成果已申請(qǐng)發(fā)明專利,相關(guān)成果發(fā)表在Biotech Bioeng雜志,天津工生所副研究員楊建剛為第一作者,孫媛霞為通訊作者。
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糖酶篩選及同工酶串聯(lián)組合表達(dá)
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